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前 言
本標(biāo)準(zhǔn)第4章為強(qiáng)制性條款。為消除公共場(chǎng)所使用紡織品存在的衛(wèi)生、質(zhì)量的隱患，保障消費(fèi)者的健康、衛(wèi)生，規(guī)范公共場(chǎng)所使用紡織品的市場(chǎng)需求，制定本標(biāo)準(zhǔn)。
本標(biāo)準(zhǔn)按GB / T1.1 —2000 《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第 1 部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)規(guī)則》 編制。
本標(biāo)準(zhǔn)附錄 A 、附錄 B 、附錄 C 、附錄 D 為規(guī)范性附錄，附錄 E 為資料性附錄。
本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省纖維檢驗(yàn)所（江蘇省紡織產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心）提出。本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省纖維檢驗(yàn)所（江蘇省紡織產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心）、南京金龍紡實(shí)業(yè)有限公司、江蘇康乃馨織造有限公司、南通斯得福紡織裝飾有限公司起草。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李輝、石慶、魏長(zhǎng)生、周觀林。
公共用紡織品安全技術(shù)規(guī)范
1 范圍
本規(guī)范規(guī)定了公共用紡織品安全技術(shù)規(guī)范的術(shù)語(yǔ)和定義、要求、試驗(yàn)方法。
本規(guī)范適用于江蘇省境內(nèi)公共場(chǎng)所用紡織品的要求。
2 規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
GB 251—1995 評(píng)定沾色用灰色樣卡
GB/T5455—1997 紡織品燃燒性能試驗(yàn)垂直法
GB/T7573—2002 紡織品水萃取液 PH 值的測(cè)定
GB/T817—1987 數(shù)值修約規(guī)則
GB18383 — 2007 絮用纖維制品通用技術(shù)要求
GB 18401 — 2003 國(guó)家紡織產(chǎn)品基本安全技術(shù)規(guī)范
FZ / T62006 —2004 毛巾
3 術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
3 . 1 公共用紡織品 linen supply
在公共場(chǎng)所，供不同的人，反復(fù)多次使用的紡織品，如：床上用品、毛巾類(lèi)產(chǎn)品、服裝、餐廳用紡織品、窗簾等。
3 . 2 醫(yī)療用公共用紡織品 hospital textiles
醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)使用的公共用紡織品，如：病房及疹療用紡織品、毛巾類(lèi)產(chǎn)品、病員服等。
3 . 3 非醫(yī)療用公共用紡織品hotel textiles
不在醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)使用的公共用紡織品。
3 . 4 人體掉落物 body secretion
從人身體上分泌、排泄、脫落的物質(zhì)。
4 要求
4 . 1 分類(lèi)
公共用紡織品按使用類(lèi)型分為為醫(yī)療用和非醫(yī)療用 2 類(lèi)。
4 . 2
安全指標(biāo)公共用紡織品安全指標(biāo)見(jiàn)表 1 。
4 . 3 公共用紡織品中毛巾類(lèi)產(chǎn)品、床單、被套、枕套、服裝不應(yīng)經(jīng)過(guò)抗菌、阻燃處理。
4 . 4 非醫(yī)療用公共用紡織品不應(yīng)用醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)部的洗滌設(shè)備進(jìn)行洗滌；醫(yī)療用公共用紡織品不應(yīng)
賓館、飯店等單位內(nèi)部的洗滌設(shè)備進(jìn)行洗滌；對(duì)外開(kāi)展洗滌服務(wù)的公司，開(kāi)展洗滌業(yè)務(wù)時(shí)，應(yīng)分別處理醫(yī)療用公共用紡織品和非醫(yī)療用公共用紡織品（包括設(shè)備、環(huán)境、人員）。
4 . 5 公共用紡織品中填充物應(yīng)符合 GB18383 的規(guī)定。
5 試驗(yàn)方法
5 . 1 細(xì)菌、真菌
5 . 1 . 1 取樣
以無(wú)菌操作用滅菌生理鹽水或 PBS 濕潤(rùn) 3 個(gè)無(wú)菌醫(yī)用棉拭子，并分別在3個(gè) 25cm2 （5cm×5cm）取樣處均勻涂抹三次，立即用滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部分，將3個(gè)棉拭子涂抹部分放入盛有30ml滅菌生理鹽水或 PBS 的容器中密封，每個(gè)容器為一份樣本，（1—5）℃ 保存， ( 4—6 ) h 內(nèi)進(jìn)行檢驗(yàn)。將放有棉拭子的容器充分振搖，此液為 1 : 10 稀釋液。
5 . 1 . 2 菌落總數(shù)
按附錄 A 規(guī)定進(jìn)行。
5 . 1 . 3 大腸菌群
按附錄 B 規(guī)定進(jìn)行。
5 .1 . 4 致病菌
按附錄 C 規(guī)定進(jìn)行。
5 .1 . 5 真菌總數(shù)
按附錄 A 規(guī)定進(jìn)行。
5 . 2 萃取液pH值
5 . 2 . 1 取樣
樣品用0 . l mol / l 氯化鉀溶液（用蒸餾水或去離子水配制）室溫浸泡，浴比 1 : 50 ，浸泡時(shí)間為 1h 士 5min ，每10min 翻動(dòng)一次，浸泡結(jié)束，取3份液樣進(jìn)行檢測(cè)。
5 .2 .2 檢驗(yàn)方法
按GB / T7573 規(guī)定進(jìn)行。
5 . 3 異味
按GB18401 —2003 中 6 . 7 規(guī)定進(jìn)行，異味種類(lèi)增加氯、汗、血腥等氣味。
5 . 4 色污漬
按GB251 規(guī)定進(jìn)行。
5 . 5 人體掉落物
按附錄 D 規(guī)定進(jìn)行。
5 . 6 吸水性
按FZ / T62006—2004 中附錄 A 規(guī)定進(jìn)行。
5 . 7 阻燃性
按GB / T5455 規(guī)定進(jìn)行。
警告 ― 使用本標(biāo)準(zhǔn)微生物檢驗(yàn)的人員應(yīng)有微生物知識(shí)和正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本標(biāo)準(zhǔn)并未指出所有可能的安全問(wèn)題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國(guó)家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。
附錄 A
（規(guī)范性附錄）
菌落總數(shù)檢驗(yàn)方法
A . 1 細(xì)菌菌落總數(shù)檢驗(yàn)方法
A . 1 . 1 以無(wú)菌（100 級(jí)）操作，吸取 1 : 10 稀釋液 2.0ml 檢樣，分別注入到兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿 1 . 0 ml 。當(dāng)估計(jì)含菌量過(guò)高時(shí)（每平皿生長(zhǎng)菌落數(shù)超過(guò) 300 個(gè)），可將采樣液作十倍遞增稀釋后再接種，即吸取1.0ml 加到9.0ml 滅菌生理鹽水中，混勻，此液為 1 : 100 稀釋液，每個(gè)稀釋度也做兩個(gè)平皿。
A . 1 . 2 將已融化冷卻至 45 ℃ 左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入平皿，每皿約（15一20 ) ml ，并輕輕旋搖平皿，使樣液混勻，待培養(yǎng)基凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿使底向上，置于（36士1）℃ 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 48h 。
A . 2 菌落數(shù)計(jì)算
作平皿菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼直接觀察，必要時(shí)用放大鏡檢查以防遺漏，在記下各平皿的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平皿生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)。若平皿中有連成片狀的菌落，該平皿不計(jì)數(shù)；若片狀菌不到平皿中的一半，而其余一半中菌落分布均勻，則可將此半個(gè)平皿菌落計(jì)數(shù)后乘以 2 ，所得結(jié)果代表全皿菌落數(shù)。
菌落總數(shù)按公式（A .1）計(jì)算：
M=k×n……………………………………………………………………………… （ A . l )
式中：m—— 細(xì)菌菌落總數(shù)， cfu / 25cm2；
k —— 稀釋倍數(shù)；
n —— 平均菌落數(shù)。
A . 3 菌落計(jì)數(shù)報(bào)告
A . 3 . 1 選擇平均菌落數(shù)在30—300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)計(jì)數(shù)（見(jiàn)表A.1中例1）。
A .3 . 2 若有兩個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)均在 30—300 之間，則由兩菌落總數(shù)之比值來(lái)決定，若其比值小于或等于2 ，應(yīng)報(bào)告平均數(shù)，若大于2 ，則報(bào)告其中稀釋度較低的平皿菌落數(shù)（見(jiàn)表A .1中例2 、例3）。
A . 3 . 3 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300 , 則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見(jiàn)表A .1中例4）。
A . 3 . 4 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30 ，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見(jiàn)表A , 1中例5）。
A . 3 . 5 若所有稀釋度平均菌落數(shù)均不在 30 —300 之間，其中一個(gè)稀釋度平均菌落數(shù)大于 300 ，而相鄰的另一個(gè)稀釋度平均菌落數(shù)小于 30 ，則以接近 30 或300 的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見(jiàn)表A .l中例 6）。
A . 3 . 6 若所有的稀釋度都無(wú)菌生長(zhǎng)，報(bào)告數(shù)為小于1 cfu / 25cm2（見(jiàn)表A.1中例7 ）。
A . 3 . 7 菌落計(jì)數(shù)報(bào)告，菌落數(shù)在 100 以?xún)?nèi)時(shí)，按實(shí)際數(shù)值報(bào)告，大于等于 100 時(shí)，采用二位有效數(shù)字，按GB / TS 170《 數(shù)值修約規(guī)則》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行舍取，可用科學(xué)計(jì)數(shù)法進(jìn)行表示（見(jiàn)表A .1中報(bào)告方式欄）。在報(bào)告菌落數(shù)為“不可計(jì)”時(shí)，應(yīng)注明樣品的稀釋度。
A . 4 真菌菌落總數(shù)檢測(cè)方法
真菌的檢測(cè)程序與細(xì)菌檢測(cè)操作程序基本相同，主要區(qū)別在于所用培養(yǎng)基、間不同。真菌培養(yǎng)用沙堡氏瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度（25士l ）℃ ，培養(yǎng)時(shí)間為5d 。要隨意打開(kāi)培養(yǎng)皿的蓋，以防止真菌袍子四處飛揚(yáng)污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境。培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)計(jì)數(shù)菌落數(shù)時(shí)，不要隨意打開(kāi)培養(yǎng)皿的蓋，以防止真菌孢子四處飛揚(yáng)污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境。
附錄B
（規(guī)范性附錄）
大腸菌群檢驗(yàn)方法
B . 1 操作步驟
以無(wú)菌（100 級(jí)）操作，取1：10 稀釋液 5ml 接種于50ml乳糖膽鹽發(fā)酵管，置（36士1 ) ℃培養(yǎng)24h , 如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為大腸菌群陰性。
如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線接種伊紅美藍(lán)瓊脂平板，置（36士l）℃ 培養(yǎng)（18—24 ) h ，觀察平板上菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。
取疑似菌落 1—2 個(gè)作革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置（36士l）℃ 培養(yǎng) 24h ，觀察產(chǎn)氣情況。
B . 2 結(jié)果報(bào)告
凡乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍(lán)平板上有典型大腸菌落，革蘭氏染色為陰性無(wú)芽胞桿菌，可報(bào)告被檢樣品檢出大腸菌群。
附錄 C
（規(guī)范性附錄）
致病菌檢驗(yàn)方法
C . 1 綠膿桿菌檢測(cè)方法
C . 1 . 1 操作步驟
以無(wú)菌（100 級(jí)）操作，取1 : 10 稀釋液 5ml ，加入到 50ml SCDLP 培養(yǎng)液中，充分混勻，置（36士1 ) ℃ 培養(yǎng)（18—24 ) h 。如有綠膿桿菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)液表面呈現(xiàn)一層薄菌膜。培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板，置（36士l）℃ 培養(yǎng)（18—24 ) h ，觀察菌落特征。銅綠假單胞菌在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落扁平，邊緣不整，光滑濕潤(rùn)，呈灰白色，菌落周?chē)囵B(yǎng)基常擴(kuò)散有水溶性色素。此培養(yǎng)基選擇性強(qiáng)，大腸桿菌不能生長(zhǎng)，革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)較差。在缺乏十六烷三甲基溴化銨瓊脂時(shí)也可用乙酰胺培養(yǎng)基進(jìn)行分離，從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種于乙酰胺瓊脂平板，置（36士l）℃ 培養(yǎng)（18—24 ) h ，觀察菌落特征。銅綠假單胞菌在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周?chē)囵B(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不生長(zhǎng)。
取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：
氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌玻璃棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的l％二甲基對(duì)苯二胺試液，（15—30 ) s 內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，不變色者為陰性。
綠膿菌素試驗(yàn)：取2—3個(gè)可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基（ PDP ）斜面， ( 36 士 l ) ℃ 培養(yǎng)（ 20 — 24 ) h ，加入氯仿（************）（3—5 ) ml ，充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解于氯仿液內(nèi)，待氯仿（************）提取液呈藍(lán)色時(shí)，用吸管將氯仿移到另一試管中并加入 1mol / l 的鹽酸 1ml ，振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽(yáng)性，表示被檢物中有綠膿菌素存在。
硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)：挑取被檢菌落純培養(yǎng)物接種在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基中，置（36士l）℃ 培養(yǎng)24h ，硝酸鹽胨水培養(yǎng)基的小倒管中有氣體者即為陽(yáng)性。表明該菌能還原硝酸鹽，并將亞硝酸鹽分解產(chǎn)生氮?dú)狻?br style="margin: 0px; padding: 0px; font-size: 12px; list-style: none; text-indent: 2em;"/> 明膠液化試驗(yàn)：取可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置（36士1）℃ 培養(yǎng) 24h，取出放于（4—10 ）℃ 冰箱30min ，如仍呈溶解狀液態(tài)為陽(yáng)性，凝固不溶者為陰性。
42 ℃ 生長(zhǎng)試驗(yàn)：取可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置（41—42 ）℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（24一48 ) h ，有綠膿桿菌生長(zhǎng)為陽(yáng)性。
C . 1 . 2 結(jié)果報(bào)告
被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實(shí)為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿桿菌試驗(yàn)為陽(yáng)性者，即可報(bào)告為被檢樣品中檢出綠膿桿菌。當(dāng)綠膿菌素試驗(yàn)為陰性時(shí)，但液化明膠試驗(yàn)、硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)和42 ℃生長(zhǎng)試驗(yàn)三者皆為陽(yáng)性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。
C . 2 金黃色葡萄球菌檢測(cè)方法
C . 2 . 1 操作步驟
以無(wú)菌（100 級(jí)）操作，取 l : 10 稀釋液 5ml ，加入到 50mLSCDLP 培養(yǎng)液中，充分混勻，置（36士l ) ℃培養(yǎng)24h 。
自上述增菌液中取1—2 接種環(huán)，劃線接種在 Baird Parker 氏培養(yǎng)基，如無(wú)此培養(yǎng)基，也可劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上，置（36士1）℃ 培養(yǎng)（24一48 ) h 。在血瓊脂平板上該菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周?chē)腥苎ΑＴ贐aird Parker 氏培養(yǎng)基上為圓形，光滑，濕潤(rùn)，菌落直徑為（2—3 )mm ，顏色呈灰色至黑色，邊緣為淡色，周?chē)鸀橐换鞚釒?，在其外層有一透明帶?br style="margin: 0px; padding: 0px; font-size: 12px; list-style: none; text-indent: 2em;"/> 染色鏡檢：挑取典型菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性球菌，排列成葡萄狀，無(wú)芽孢與夾膜，直徑為（0 . 5—1 . 0）μm。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：
甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述菌落接種甘露醇培養(yǎng)液，置（36士l）℃ 培養(yǎng) 24h ，發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽(yáng)性。
血漿凝固酶試驗(yàn)：
波片法：取清潔干燥載玻片，一端滴加一滴生理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿，挑取菌落分別與生理鹽水和血漿充分研磨混合，血漿與菌苔混懸液在5min 內(nèi)出現(xiàn)團(tuán)塊或顆粒狀凝塊時(shí)，而鹽水滴仍呈均勻混濁無(wú)凝固現(xiàn)象為陽(yáng)性，如兩者均無(wú)凝固現(xiàn)象為陰性。凡玻片試驗(yàn)呈陰性反應(yīng)或鹽水滴與血漿均有凝固現(xiàn)象，再進(jìn)行試管凝固酶試驗(yàn)。
試管法：吸取1：4 新鮮血漿0 .5ml ，放入滅菌小試管中，再加入待檢菌24h 肉湯培養(yǎng)物0 .5ml ?；靹颍牛?6士1）℃ 培養(yǎng)箱或水浴中，每30min觀察一次，24h之內(nèi)呈現(xiàn)凝塊即為陽(yáng)性。同時(shí)以已知血漿凝固酶陽(yáng)性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物各0 .5ml 作為陽(yáng)性與陰性對(duì)照。
C . 2 . 2 結(jié)果報(bào)告
凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長(zhǎng)，鏡檢為革蘭氏陽(yáng)性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗(yàn)為陽(yáng)性者，可報(bào)告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。
C . 3 溶血性鏈球菌檢測(cè)方法
C . 3 . 1 操作步驟
以無(wú)菌（ 100 級(jí)）操作，取 1 : 10 稀釋液 5ml 加入到50ml葡萄糖肉湯中，置于（36 士 l ）℃ 培養(yǎng) 24h 。
將培養(yǎng)物劃線接種于血瓊脂平板，( 36士1）℃培養(yǎng)24h 觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周?chē)袩o(wú)色透明溶血圈。
染色鏡檢：挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢，應(yīng)為革蘭氏陽(yáng)性，呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：
鏈激酶試驗(yàn)：吸取草酸鉀血漿 0.2ml ( 0 . 01g 草酸鉀加5ml兔血漿混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液），加入0.8ml 滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌 24h 肉湯培養(yǎng)物0 .5ml和0.25％氯化鈣0 .25ml , 混勻，放（36士l）℃ 水浴中，2min 觀察一次（一般 10min 內(nèi)可凝固），待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄熔化時(shí)間。如 2h 內(nèi)不熔化，繼續(xù)放置 24h 觀察，如凝塊全部熔化為陽(yáng)性，24h仍不熔化為陰性。
桿菌肽敏感試驗(yàn)：將被檢菌落液涂于血平板上，用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上，同時(shí)以己知陽(yáng)性菌株作對(duì)照，在（36士2）℃ 下放置（18—24 ) h ，有抑菌帶者為陽(yáng)性。
C . 3 . 1 結(jié)果報(bào)告
鏡檢革蘭氏陽(yáng)性鏈狀排列球菌，血平板上呈現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗(yàn)陽(yáng)性，可報(bào)告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。
附錄 D
（規(guī)范性附錄）
人體掉落物檢驗(yàn)方法
D . 1 原理
以人眼感觀檢測(cè)樣品上是否有毛發(fā)、皮屑、體液、污漬等。
D. 2 試驗(yàn)條件
檢測(cè)人員應(yīng)先洗臉、洗手，并將頭發(fā)、手、臂等密封起來(lái)，以防自身污染影響檢測(cè)結(jié)果。
D. 3 樣品
毛巾類(lèi)用品、服裝等可以是擺放好待用的，也可以是擺放前成包的；床上用品應(yīng)該是擺放好待用的。
D. 4 方法
現(xiàn)場(chǎng)以人眼感觀檢驗(yàn)為主，需要時(shí)可輔以（l—2）倍的放大鏡、尖嘴鑷子檢測(cè)是否有毛發(fā)、皮屑、體液、污漬等，對(duì)最大尺寸小于1.0mm的物體不予以判斷，檢測(cè)到的物質(zhì)應(yīng)收集、密封保存。
附錄 E
（資料性附錄）
培養(yǎng)基與試劑制備
E.1 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10.0g
牛肉膏 3.0g
氯化鈉 5.0g
瓊脂 15g—20g
蒸餾水 I000ml
制法：除瓊脂外其他成分溶解于蒸餾水中，調(diào)pH至7.2—7.4，加入瓊脂，加熱溶解，分裝試管，121 ℃ 高壓滅菌 20min 后備用。
E.2 乳糖膽鹽發(fā)酵管
成分：
蛋白胨 20.0g
豬膽鹽（或牛、羊膽鹽） 5.0g
乳糖 10.0g
0.04％溴甲酚紫水溶液 25ml
蒸餾水 加至1000ml
制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH至7.4，加入指示劑，分裝每管 50ml ，并放入一個(gè)小倒管， 115℃ 高壓滅菌15min后備用。
E.3 乳糖發(fā)酵管
成分：
蛋白胨 20.0g
乳糖 10.0g
0 . 04 ％溴甲酚紫水溶液 25 ml
蒸餾水 加至1000ml
制法：將蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH至7.4 ，加入指示劑，分裝每管 10ml ，并放入一個(gè)小倒管， 115 ℃高壓滅菌15min后備用。
E.4伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB )
成分：
蛋白胨 20.0g
乳糖 10.0g
磷酸氫二鉀 2.0g
瓊脂 15g 一 20g
2 ％伊紅 Y溶液 20ml
0.65 ％美藍(lán)溶液 10ml
蒸餾水 加至 1000ml
制法：將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH至7.1，分裝于燒瓶?jī)?nèi)，121 ℃ 高壓滅菌 15min 備用，臨用時(shí)并加熱溶化瓊脂加入乳糖（過(guò)濾滅菌），冷至 55 ℃ ，加入伊紅和美藍(lán)溶液搖勻，傾注平板。
E.5SCDLP 液體培養(yǎng)基
成分：
酪蛋白胨 17 . 0g
大豆蛋白胨 3 . 0g
氯化鈉 5 . 0g
磷酸氫二鉀 2 . 5g
葡萄糖 2 . 5g
卵磷脂 1 . 0g
吐溫 80 7 . 0g
蒸餾水 1000ml
制法：將各種成分混合（如無(wú)酪蛋白胨和大豆蛋白胨也可用日本多價(jià)胨代替），加熱溶解，調(diào)pH 至7.2 — 7.3 ，分裝， 121 ℃ 高壓滅菌 20min ，搖勻，避免吐溫80沉于底部，冷至 25 ℃ 后使用。
E.6十六烷三甲基溴化銨培養(yǎng)液
成分：
牛肉膏 3 . 0g
蛋白胨 10.0g
氯化鈉 5 . 0g
十六烷三甲溴銨 0.3g瓊脂 15g —20g
蒸餾水 1000ml
制法：除瓊脂外，上述各成分混合加熱溶解，調(diào)pH 至 7.4 一 7.6 ，然后加入瓊脂， 115℃ 高壓滅菌 20min ，冷至 55 ℃ 左右，傾注平皿。
E.7 乙酰胺培養(yǎng)基
成分：
乙酰胺 10.0g
氯化鈉 5.0g
無(wú)水磷酸氫二鉀 1.39g
無(wú)水磷酸二氫鉀 0.73g
硫酸鎂（ MgSO 4? 7H2O ) 0.5g
酚紅 0.012g
瓊脂 15g一 20g
蒸餾水 1000ml
制法：除瓊脂和酚紅外，將其他成分加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH 至 7.2—7.4，然后加入瓊脂和酚紅，121 ℃ 高壓滅菌 20min 后，制成平板備用。
E.8 綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基斜面
成分：
蛋白胨 20.0g
氯化鎂 1 . 4g
硫酸鉀 10 . 0g
瓊脂 15g—20g
甘油（化學(xué)純） 10.0g
蒸餾水 加至1000ml
制法：將蛋白胨、氯化鎂和硫酸鉀加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH 至7.4，加入瓊脂和甘油，加熱溶解，分裝試管，l15 ℃高壓滅菌20min ，制成斜面?zhèn)溆谩?br style="margin: 0px; padding: 0px; font-size: 12px; color: rgb(0, 0, 0); list-style: none; text-indent: 2em;"/>E.9 明膠培養(yǎng)基
成分：
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 5.0g
明膠 120g
蒸餾水 1000ml
制法：各成分加入蒸餾水中浸泡20min ，加熱攪拌溶解，調(diào)pH 至7.4, 5ml分裝于試管中， 115 ℃高壓滅菌20min ，直立制成高層備用。
E.10 硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10.0g
酵母浸膏 3.0g
********* 12.0g
亞硝酸鈉 0.5g
蒸餾水 1000ml
制法：將蛋白胨與酵母浸膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH至7.2，煮沸過(guò)濾后補(bǔ)足液量，加入硝酸鉀和亞硝酸鈉溶解均勻，分裝到加有小倒管的試管中，115 ℃高壓滅菌20min 備用。
E.11 Baird Parker 培養(yǎng)基
成分：
胰蛋白胨 10.0g
牛肉膏 5.0g
酵母浸膏 1.0g
丙酮酸鈉 10.0g
甘氨酸 12.0g
氯化鋰（ LiC1 ? 6HzO ) 5.0g
瓊脂 20g
蒸餾水 1000ml
增菌劑的配制： 30% 卵黃鹽水50ml 與除菌過(guò)濾的1％亞碲酸鉀溶液10ml 混合，保存于冰箱內(nèi)備用。
制法：將各成分加到蒸餾水中，加熱煮沸完全溶解，冷至25 ℃調(diào)pH7.2。 分裝每瓶95ml , 121 ℃ 高壓滅菌20min 后備用。臨用時(shí)加熱溶化瓊脂，每95ml加入預(yù)熱至50 ℃ 的卵黃亞碲酸鉀增菌劑 5ml ，搖勻后傾注平板。培養(yǎng)基應(yīng)是致密不透明的，使用前在冰箱儲(chǔ)存不得超過(guò)18h。
E.12 血瓊脂培養(yǎng)基
成分：
營(yíng)養(yǎng)瓊脂 100ml
脫纖維羊血（或兔血） 10ml
制法：將滅菌后的營(yíng)養(yǎng)瓊脂加熱溶化，涼至55 ℃ 左右，用無(wú)菌方法將10ml脫纖維血加入后搖勻，傾注平皿置冰箱備用。
E.13 甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10.0g
牛肉膏 5.0g
氯化鈉 5.0g
甘露醇 10.0g
0.2％溴麝香草酚藍(lán)溶液 12ml
蒸餾水 1000ml
制法：將蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH至7.4，加入甘露醇和溴麝香草酚藍(lán)混勻后，分裝試管，115℃高壓滅菌20min備用。
E.14 葡萄糖肉湯
成分：
蛋白胨 10.0g
牛肉膏 5.0g
氯化鈉 5.0g
葡萄糖 10.0g
蒸餾水 1000ml
制法：上述成分溶于蒸餾水中，調(diào)pH 至 7.2—7.4 ，加熱溶解，分裝試管，121℃高壓滅菌15min后備用。
E.15 兔血槳
制法：取滅菌3.8％檸檬酸鈉1份，兔全血4份，混勻靜置，3000r / min 離心5min ，取上清，棄血球。
E.16 沙堡氏瓊脂培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10.0g
葡萄糖 40.0g
瓊脂 15g —20g
蒸餾水 1000ml
制法：用700ml 蒸餾水將瓊脂溶解，300ml蒸餾水將葡萄糖與蛋白胨溶解，混合上述兩部分，搖勻后分裝，l15℃高壓滅菌15min備用。使用前，用過(guò)濾除菌方法加入 0.1g/l 的氯霉素或者 0.03g/l的鏈霉素。
定性試驗(yàn)采用沙氏培養(yǎng)液，除不加瓊脂外其他成分與制法同上。
E.17 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液
成分：
蛋白胨 10.0g
氯化鈉 5.0g
牛肉膏 3.0g
蒸餾水 1000ml
制法：調(diào)節(jié)pH 至7.2—7.4，分裝， 115℃高壓滅菌20min備用。
E.18 澳甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基
成分：
蛋白胨 10.0g
葡萄糖 5.0g
蒸餾水 1000ml
制法：調(diào)節(jié)pH至7.0—7.2 ，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6ml , 115℃高壓滅菌20min備用。
E.19 革蘭氏染色液
結(jié)晶紫染色液：
結(jié)晶紫 1.0g
95％乙醇 20ml
1％草酸銨水溶液 80ml
將結(jié)晶紫溶解于乙醇中，然后與草酸銨溶液混合。
革蘭氏碘液
碘 1.0g
碘化鉀 2.0g
蒸餾水 300ml
脫色劑
95 ％乙醇
復(fù)染液：
(1) 沙黃復(fù)染液：
沙黃 0.25g
95％乙醇 10ml
蒸餾水 90ml
將沙黃溶解于乙醇中，然后用蒸餾水稀釋。
(2) 稀石炭酸復(fù)紅液：
稱(chēng)取堿性復(fù)紅10g ，研細(xì)，加95％乙醇100ml ，放置過(guò)夜，濾紙過(guò)濾。取該液10ml,加5％石炭酸水溶液90ml混合，即為石炭酸復(fù)紅液。再取此液10ml ，加水90ml ，即為稀石炭酸復(fù)紅液。
E.20 0.03mol / L 磷酸鹽緩沖液（PBS , pH7.2)
成分：
磷酸氫二鈉 2.83g
磷酸二氫鉀 1.36g
蒸餾水 1000ml
